第三節(jié)　寄生蟲實驗動物保種

　　寄生蟲的動物保種，是將其感染期接種于實驗動物，使蟲體在動物體內(nèi)存活，以利于寄生蟲與寄生蟲病的研究、寄生蟲病診斷以及制備教學標本等。

　　一、杜氏利什曼原蟲無鞭毛體

　　取患者的前述組織穿刺物，用適量生理鹽水稀釋后，注射于田鼠（或金黃地鼠）腹腔內(nèi)，每只鼠注射0.5ml，放籠內(nèi)飼養(yǎng)。一個月后殺死田鼠，取其肝、脾組織作涂片，染色，鏡檢。轉種時將感染利肝曼原蟲的田鼠解剖，取其肝、脾置于消毒的組織研磨器中或研缽中，加入少量生理鹽水研磨為勻漿后，再加適量生理鹽水稀釋，用消毒注射器吸取稀釋液注射健康田鼠腹腔內(nèi)，每只鼠注入0.2～0.5ml，繼續(xù)飼養(yǎng)。3～4周后，按前述方法進行檢查。原蟲在動物體內(nèi)可生存數(shù)月。

　　二、剛地弓形蟲

　　經(jīng)穿刺抽取病人的腦脊液0.5～1ml，注射于體重18～25g的健康小白鼠腹腔內(nèi)。3周后抽取小白鼠腹腔液作涂片檢查（查滋養(yǎng)體）。如為陰性再取肝、脾、腦組織研磨為勻漿，按1：10量加入無菌生理鹽水稀釋，進行第二次接種。如仍為陰性可用同法進行2～3次，再觀察結果。陽性者可作接種傳代，每2周一次，以保種。

　　接種小鼠，每只注射0.3～0.5ml的勻漿。感染后每天觀察，即抽取腹腔液涂片，染色后觀察。一般感染第四天可見到弓形蟲滋養(yǎng)體。

　　抽取病鼠腹腔液方法，是在其腹部作一切口，用鑷子夾提腹部的皮膚和腹膜，用1ml注射器吸取1ml生理鹽水，迅速注入腹腔，輕揉腹壁，使生理鹽水和腹腔液混勻，然后再抽出腹腔液檢查。

　　三、旋毛蟲

　　將感染旋毛蟲的小白鼠（或大白鼠）殺死，剝皮，取其肌肉；也可取含有幼蟲的豬肉，剪成米粒大小，取1小塊肉置在載玻片上壓片檢查，以含有100～200個幼蟲囊包量的肌肉，經(jīng)口喂健康小白鼠，喂前應饑餓小鼠24小時；或將含有幼蟲囊包的肌肉剪碎，置于含有消化液的三角瓶內(nèi)，一般每1g肌肉加入60ml的消化液，置37～40℃溫箱中，經(jīng)10～18小時（此間經(jīng)常搖動燒瓶或攪拌），去掉上層液，然后以水洗沉淀法或離心沉淀法收集幼蟲。以生理鹽水洗滌2～3次，用1ml的注射器和8號針頭吸取100～200條幼蟲，經(jīng)腹腔注射或喂飼健康小白鼠（或大白鼠）。感染第5周后，可在鼠肌中（以膈肌、腿部肌多見）可找到幼蟲囊包。幼蟲在動物體內(nèi)可生存3個月或半年。醫(yī)學教育網(wǎng)

　　四、血吸蟲

　　1.實驗動物一般用18～22g體重的健康小白鼠或2～4kg家兔。

　　2.尾蚴逸出將陽性釘螺2～3只放入指管（1×7cm）中、加入去氯水或冷開水至管口，管口蓋以銅絲網(wǎng)，以防釘螺爬出。置25℃孵育4～12小時，尾蚴可陸續(xù)逸出浮于水面。

　　3.感染動物將小白鼠或家兔仰臥固定在木板上，剪去腹毛，范圍約5×5cm約1～2張蓋片大小），用清水洗凈腹部皮膚。用白金耳沾取液面的尾蚴置于蓋玻片上，在解剖鏡下計算尾蚴數(shù)量。通常感染小白鼠每只50條尾蚴，家兔500～800條即可。將含已計數(shù)尾蚴的蓋片，翻轉覆蓋在動物腹部的去毛處，使其與皮膚接觸，同時在蓋片與皮膚之間滴加少許清水，以保持濕潤；冬季應保持溫度在25℃左右，15～20分鐘后取下蓋片。感染后約40～45天，即能在動物糞便中查到蟲卵。操作中應防止感染，用過器材應消毒。

　　五、華支睪吸蟲

　　常用實驗動物有貓、犬、豚鼠、大白鼠、兔等。取含有華支睪吸蟲囊蚴的魚肉，用人工消化液消化后收集純凈的囊蚴。將囊蚴拌入飼料喂食或直接從口內(nèi)插入橡皮管注入胃內(nèi)。感染囊蚴的數(shù)量，因動物大小而異，以200～400個為宜。感染后一個月，即可自糞便內(nèi)檢獲蟲卵。

　　六、衛(wèi)氏并殖吸蟲

　　常用實驗動物有犬、貓。將感染該種吸蟲囊蚴的溪蟹或蝲蛄，放入清水中洗凈后，用研缽或絞肉機搗碎，經(jīng)篩過濾去除粗殼渣，以沉淀法反復清洗至水清。吸出沉渣放在雙筒解剖鏡下檢查，用滴管吸取囊蚴并計數(shù)，將定量囊蚴拌入飼料喂動物。也可將囊蚴放入含有2%膽酸鹽溶液中，置40℃1小時，使后尾蚴脫囊。用無菌生理鹽水洗滌后，給貓或犬進行腹腔注射。幼蟲數(shù)量以100～300個為宜。約2個月后可在糞便中檢出蟲卵。

　　注：人工消化液配方

　　鹽酸　0.4ml

　　胃蛋白酶 25g

　　蒸餾水100ml