【關(guān)鍵詞】 生化檢驗(yàn)

　　【摘要】 目的 對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果與臨床不符的探討。 方法 在自動(dòng)生化分析儀器上，觀察到血清顏色對(duì)一部分生化檢驗(yàn)結(jié)果具有很強(qiáng)的干擾作用。結(jié)果 以甘油三酯為例：血紅蛋白含量1g/L的血清標(biāo)本測(cè)得甘油三酯平均值比標(biāo)準(zhǔn)高出0.27mmol/L；總膽紅素含量232mmol/L的血清標(biāo)本測(cè)得甘油三酯平均值比標(biāo)準(zhǔn)高出0.28mmol/L.結(jié)論 我們通過(guò)改進(jìn)自動(dòng)生化分析儀的檢測(cè)程序，在不影響系統(tǒng)資源的情況下較好地消除了這種干擾。

　　【關(guān)鍵詞】 自動(dòng)生化分析儀 檢驗(yàn)結(jié)果 顏色干擾

　　根據(jù)臨床觀察，生化自動(dòng)分析儀具有分析速度快，結(jié)果重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。但偶爾也有醫(yī)生反映黃疸病人的檢測(cè)結(jié)果與臨床不符，這應(yīng)當(dāng)仔細(xì)分析其原因。

　　眾所周知，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中，血液中的許多化學(xué)物質(zhì)大多是通過(guò)在血清中加入不同的化學(xué)試劑使之發(fā)生化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化來(lái)測(cè)定其含量。然而，不同的人體血清標(biāo)本，顏色（如：黃疸、溶血）差異很大，標(biāo)本底色的不同無(wú)疑會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響和干擾。在傳統(tǒng)的手工檢測(cè)方法中，這種顏色差異的干擾通常用空白對(duì)照予以消除；在一些自動(dòng)生化分析儀器上，為了節(jié)約系統(tǒng)資源和增加儀器的檢測(cè)速度，大多數(shù)化驗(yàn)項(xiàng)目的檢測(cè)程度均沒(méi)有高設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)的空白對(duì)照管，那么血清顏色對(duì)其結(jié)果是否有影響，影響有多大，怎樣才能減小甚至消除這種影響？筆者以檢測(cè)甘油三酯為例，做一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)：我們?cè)赗A-500自動(dòng)生化分析儀上用生理鹽水代替試劑對(duì)溶血和黃疸標(biāo)本分別進(jìn)行了20次重復(fù)檢測(cè)，其結(jié)果血紅蛋白含量1g/L的標(biāo)本測(cè)得甘油三酯的平均值為0.27mmol/L；總膽紅素含量232mmol/L的標(biāo)本測(cè)得甘油三酯平均值0.28mmol/L.可見(jiàn)血清顏色對(duì)RA系列自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)甘油三酯有很強(qiáng)的干擾，筆者對(duì)其原因進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)其檢測(cè)程序?yàn)椴辉O(shè)空白對(duì)照管的終點(diǎn)法。因?yàn)樵搩x器出廠時(shí)設(shè)置的終點(diǎn)法操作程序在加入血清后不能再讀空白，所以血清的顏色被累積入化學(xué)反應(yīng)顏色的“加深”，從而使檢測(cè)結(jié)果增高。因此，只要是以這種模式來(lái)進(jìn)行試驗(yàn)操作的生化分析義，血清顏色都會(huì)影響它的檢驗(yàn)結(jié)果。

　　如何消除這種影響？筆者嘗試用雙波長(zhǎng)法進(jìn)行補(bǔ)償，但效果不理想；用增設(shè)標(biāo)本空白來(lái)消除這種干擾，則使試劑消耗增加一倍，且生化分析儀的檢測(cè)速度下降約50%，不利于系統(tǒng)資源的充分利用。為了解決這一問(wèn)題，筆者對(duì)該儀器的操作程序進(jìn)行了認(rèn)真的分析，發(fā)現(xiàn)其一級(jí)速率反應(yīng)法的操作程序比較其終點(diǎn)法可增加一次在加樣后15s內(nèi)再讀空白的操作。于是筆者對(duì)它的一級(jí)速率法檢測(cè)模式加以改良后用于甘油三酯做終點(diǎn)檢測(cè)，結(jié)果顯示可以有效地排除血清顏色對(duì)甘油三酯檢驗(yàn)結(jié)果的影響。

　　1材料與方法

　　1.1材料 （1）RA-500自動(dòng)生化分析儀。（2）元生甘油三酯檢測(cè)試劑。

　　1.2方法 在自動(dòng)生化分析儀上設(shè)置一級(jí)速率法檢測(cè)模式，標(biāo)本3.5μl，試劑350μl，波長(zhǎng)500nm，延遲時(shí)間15s孵育時(shí)間5min，RGT RATE=0；測(cè)得終點(diǎn)光密度減空白讀數(shù)即得5min光密度增加值，再根據(jù)同樣方法處理的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和光密度即可求得每升血清中甘油三酯的含量。

　　2實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.1重復(fù)性試驗(yàn) 取一份定值1.20mmol/L質(zhì)控血清，按上述方法測(cè)定20次經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，均值為1.19mmol/L，CV=1.22%，OCV符合世界衛(wèi)生組織的規(guī)定。

　　2.2干擾、對(duì)照試驗(yàn) 把溶血標(biāo)本和黃疸標(biāo)本用本法和有標(biāo)本空白對(duì)照管的終點(diǎn)法分別進(jìn)行20次檢測(cè)對(duì)照。兩種方法比較，結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，P>0.05；數(shù)據(jù)顯示血清中含血紅蛋白（1g/L）或總膽紅素（232mmol/L）對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)影響。

　　2.3回收率測(cè)定 取已知含量的甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)液一份，分別加入不同量的甘油三酯，然后再分別測(cè)定其含量，求得高、中、低值平均回收率為98.8%.

　　3討論把一級(jí)速率法檢測(cè)模式用于終點(diǎn)法檢驗(yàn)項(xiàng)目，有兩個(gè)值得注意的問(wèn)題：一是由于這些反應(yīng)的濃度與光密度增加的速度線性關(guān)系不夠理想，所以孵育時(shí)間應(yīng)足夠長(zhǎng)以測(cè)得其終點(diǎn)光密度為最好；二是為減少在延遲時(shí)間內(nèi)的呈色損失，延遲時(shí)間應(yīng)盡可能短，以試劑與標(biāo)本剛好混合均勻?yàn)橐恕?

　　將一級(jí)速率法檢測(cè)模式用于終點(diǎn)檢測(cè)有一定的局限性，它要求呈色反應(yīng)的速度不能太快，以15s左右開(kāi)始反應(yīng)，5min以內(nèi)達(dá)到終點(diǎn)為最好。

　　我們將上述方法用于日常工作，兩年多來(lái)，這一項(xiàng)目的檢驗(yàn)結(jié)果均與臨床相符合，醫(yī)生反映良好。

　　可以參考我們的方法對(duì)其他分析儀器進(jìn)行血清顏色的干擾試驗(yàn)，如果有干擾，可以采取上述方法或其他的應(yīng)對(duì)措施使檢驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確，更好地為臨床服務(wù)，有興趣的同行值得一試。