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血液標本的采集和處理：

血液標本的采集是分析前質量控制的重在環(huán)節(jié)，可分為毛細血管采血法和靜脈采血法。需要血量較少的檢驗，如手工法或半自動血細胞分析儀血細胞計數(shù)，常用毛細管采血法。需血量較多檢驗，如紅細胞比積、臨床生化檢驗、全自動血細胞分析血細胞計數(shù)一般用靜脈采血法。特別是全自動血細胞分析儀，無論儀器進樣品多少，為防止血樣中小凝塊的形成，保證儀器進樣時標本能充分混勻，原則上均應使用靜脈血。毛細血管血和靜脈血之間，無論細胞成分或化學組成，都存在程度不同的差異。在判斷和比較所得結果時必須予以考慮。

某些生理因素，如吸煙、進食、運動和情緒激支等，均可影響血液成分。甚至一日之間，白細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞絕對值、淋巴細胞各亞群的比例等參數(shù)均有一定的波動。服用某些藥物可能明顯干擾實驗，得出假象結果。因此采血時，應詢問濁否服用過明顯干擾試驗的藥物（如阿司匹林對血小板聚集的抑制作用）關盡可能在一定時間在避免干擾因素條件下進行，以便于比較和動態(tài)分析。

一、毛細血管采血法

成人常用手指或耳垂采血。耳垂采血痛較輕，操作方便，適用于肥復采集，特別是手指皮膚粗厚者，但耳垂外周血循環(huán)較差，血細胞容易停滯，受氣溫影響較大，檢查結果不夠恒定。紅細胞、白細胞、血紅蛋白和紅細胞比積結果均比靜脈血高，特別是冬季小波動幅度更大。手指采血操作方便?？色@較多血量。嬰幼兒手指太小可用拇指或足跟采血。嚴重燒傷患者，可選擇皮膚完整處采血，采血器以用帶帶三棱針或專用的“采血針”為好，特別是后者有利于采血技術的質量控制，為了避免交叉應嚴格實行一人一針制。應注意穿刺的深度的適當，切忌用力擠壓，以免混入組織液，影響檢驗結果。

二、靜脈采血法

幾位于體表的淺靜脈均可作為采血部位，通常采用肘部靜脈，肘部靜脈不明顯時，可用手背靜脈或內踝靜脈。幼兒可于頸外靜脈采血。根據(jù)采血量可選用不同型號注射器配血相應的針頭。某些特殊的檢查，比臺血小板的激活，要使用塑料注射器和硅化處理后的試管或塑料閉幕式管。采血前應向病人作適當解釋，以消除不必要的疑慮和恐懼。如遇個別病人采血后發(fā)生暈厥，可讓其平臥，通常休息片刻即可恢復。必要時可嗅芳香氨酊，針刺或指掐人中，合谷等穴位。止血帶壓迫時間不難過長，歸好不超過半分鐘，以避免瘀血和血液濃縮，有試驗證明，壓迫時間過長，可引起纖溶活性增強，血小板釋放及甘些因子活性增強，影響某些實驗結果。注射器和容器必須干燥，抽血時避免產(chǎn)生大量泡沫，向血后應先拔針頭，然后將血液徐徐注入標本容器。否則可能導致溶血。溶血標本不僅紅細胞半數(shù)，紅細胞比積降低，血漿清化學組成也會產(chǎn)生變化，影響鉀、鎂、轉氨酶等多項指標的測定。有些試驗需用具有嚴密寒緊的，潔凈的橡膠或塑料寒子的玻璃或塑料管作采血及儲存器。目前國外已經(jīng)普及（國內已開始生產(chǎn)）的封閉式真空采血器，既有利于標本的收集運送和保存，又便于防止血液交叉感染，已開始在國內推廣使用。

血液標本的保存條件非常重要，不適當保存直接影響實驗結果。文獻報導，既便將血漿放在4.C冰箱內保存，24小時后的因子活性也僅為采血后即刻實驗結果的5%（減少95%），而供血液分析儀進行細胞計數(shù)的血液只能在室溫下保存，低溫保存可使血小板計數(shù)結果減低。因此，應根據(jù)實驗項止確定最佳的保存條件。

三、抗凝劑

抗凝劑種類很多，性質各異，必須根據(jù)檢驗止的適當選擇，才能獲得預期的結果?，F(xiàn)將實驗常用抗凝劑及其使用方法簡述如下：

1、乙二胺四乙酸（EDTA）鹽EDTA有二鈉、二鉀和三鉀鹽。均可與鈣離子結全成螯合物，從而阻止血液凝固。

Na2C10H14O8N2+CA2+→CAC10H12O8N2+2NA++2H+

EDTA鹽經(jīng)1000C烘干，抗凝作用不變，通常配成15g/L水溶液，每瓶0.4ml，干燥后可抗凝5ml血液。EDTA鹽對紅、白細胞形態(tài)影響很小，根據(jù)國際血液學標準公委員會（Internationalcommitteestandardofhematology，ICSH）1993年文件建議，血細胞計數(shù)用EDTA二鉀作抗凝劑，用量為EDTA-K2.2H2O1.5-2.2Mg（4.45±0.85μmol）/ml血液。EDTA-NA與EDTA-K2對血細胞計數(shù)影響均較小，但二鈉溶解度明顯低于二鉀，有時影響抗凝效果，其他抗凝劑不適合于血細胞計數(shù)。表1-1是幾種抗凝劑對白細胞計數(shù)的影響，EDTA影響小板聚集，不適合于作凝血象檢查和血小板功能試驗。

2.枸椽酸鈉枸椽酸鹽可與血中鈣離子形成可溶性螯合物，從而阻止血液凝固醫(yī)學`教育網(wǎng)搜集整理。

2Na3C6H5O7+2CA2+→2CAC6H5O7-+6Na+

枸椽酸鈉有2Na3C6H5O7.和2Na3C6H5.11H2O等多種晶體。通常用前者配成109mmol/l（32g/l）水溶液（也有用106mmol/l濃度），與血液按1：9或1：4比例使用。枸椽鈉對凝血V因子有較好的保護作用，使其活性減低緩，故常用于凝血象的檢查，也用于紅細胞沉降率的測定。因毒性小，是輸積壓保養(yǎng)中的成分之一。

由于枸椽酸鈉溶液是按體積肥比例加入血液內達到抗凝目的的，而抗凝劑主要是作用于積壓漿成分，通常所謂的1：9比例抗凝的概念是提1份體積的抗凝劑作用9份紅細胞比積正常血液內的血漿成分而言。所以臺果對貧血或紅細胞增多癥患者的血液仍按1：9的比例加入抗凝劑時，就會發(fā)生抗凝劑足或相對過多，這將明顯地影響凝象檢查結果。為了避免這種現(xiàn)象，有文獻報道應根據(jù)抗凝劑用量（ml）=0.00185×血量×（100—病人紅細胞比積%）這一公式，來計算抗凝劑的用量。

3．草酸鈉（sodiumoxalate）草酸鹽可與血中鈣離子生成草酸鈣沉淀，從而阻止血液凝固。

草酸鈉通常用0.1mol/L濃度，與血液按1：9比例使用，過去主要用于凝務象檢查。實踐發(fā)現(xiàn)草酸鹽對凝備V因子保護功能差，影響凝血酶原時間測定效果；另外由于草酸鹽與鈣結合形成的是沉淀物，影響自動凝血儀的使用，因此，多數(shù)學者認為凝積壓象檢查選用枸椽酸鈉為抗凝劑更為適宜。

4．肝素（heparin）肝素廣泛在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細胞和暑堿性粒細胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團的粘多糖，是分散物質，平均分子量為15000（2000-40000）。肝素可加強抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）滅活絲氨酸蛋白酶，從而具有阻止凝血酶形成，對抗凝血酶和阻止血小板聚集等多種作用。每毫升血液抗凝需要持素15±2.5Iu.盡管肝素可以保持紅細胞的自然形態(tài)，但由于其?？梢鸢准毎奂P使用涂片在羅氏（）染色時產(chǎn)生藍色背景，因此肝素抗凝血不適全血液學一般檢查。肝素是紅細胞透滲脆性試驗理想的抗凝劑。