目前，藥物性肝損傷（drug-induced liver injury，DILI）越來越引起人們重視。在美國，藥物性肝損傷是導致急性肝功能衰竭的首要原因，為之而設立的藥物性肝損傷研究網(wǎng)絡（DILIN）旨在探索一種用以診斷、評估藥物性肝損傷的標準化方案。近日，美國國立衛(wèi)生院相關工作組總結(jié)出一個包括臨床特征在內(nèi)的、用以診斷藥物性肝損傷的框架圖，有助于減少高危潛在肝毒性藥物的暴露，提高患者的安全性。

藥物性肝損傷的基因?qū)W研究

藥物主要在肝臟代謝，長久以來，藥物代謝酶是藥物性肝損傷研究的重要靶點。

1. 藥物代謝酶

細胞色素P450

細胞色素P450（cytochrome P450 proteins，CYP）是肝臟藥物Ⅰ相代謝的主要酶類。與藥物性肝損傷相關的CYP主要有CYP1A2、CYP2A6、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4等。如果這些酶類出現(xiàn)遺傳多態(tài)性，則使原藥或其中間代謝產(chǎn)物造成積累，從而導致藥物性肝損傷的發(fā)生。

尿核苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶

遺傳缺陷疾病及抗驚厥藥物可致尿核苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶（uridine diphosphate glucuronosyltransferases，UGT）活性降低。Gilbert's綜合征患者服用對乙酰氨基酚后，肝損害的易感性增加。此外，苯巴比妥和苯妥英可抑制UGT活性，并可作為CYP的誘導劑，促進毒性代謝產(chǎn)物N-乙酰醌亞胺（NAPQI）的生成。

N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2

一些藥物及其中間體（如異煙肼）需N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2代謝解毒。若該酶發(fā)生遺傳多態(tài)性，將會導致藥物性肝損傷發(fā)生。

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶

谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶（glutathione S-transferase，GST）是一種重要的Ⅱ相藥物代謝酶，通常作為結(jié)合酶起雙重作用，在藥物Ⅰ相代謝過程中通過“中和”效應避免肝損傷，同時參與肝臟解毒功能的下游機制。GSTT1-GSTM1空白基因型的患者，在應用抗菌藥、非甾體類抗炎藥、抗結(jié)核藥物、曲格列酮以及他克林等藥物時，發(fā)生藥物性肝損傷的風險顯著增加。

以胰島素增敏劑噻唑烷酮類的曲格列酮為例，該藥在臨床試驗2 510例患者中ALT>3倍正常值上限（ULN）發(fā)生率為1.9%，安慰劑組為0.6%，治療組12例ALT≥10×ULN，5例≥20×ULN，而安慰劑組為0，這實際上已為上市后提供了可預測的不良事件。曲格列酮所致的藥物性肝損傷中，CYP2C19*2等位基因變異占46%.以后又發(fā)現(xiàn)這些患者Ⅱ相代謝酶GST也存在遺傳多態(tài)性，GSTT1和GST1M兩基因缺陷，與ALT和AST升高密切相關。

2. 人類白細胞抗原

6號染色體上高變異的人類白細胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）與免疫反應密切相關，它在藥物基因?qū)W的研究中具有特殊意義。特異性HLA基因型與阿莫西林-克拉維斯所致肝損傷強相關，從而成為藥物性肝損傷研究的重要靶點之一。一項研究顯示，HLA-DRB1*1501位點與膽汁淤積型藥物性肝損傷強相關，但引起肝損傷易感性增加的確切機制有待探索。

3. 線粒體氧應激相關酶

線粒體超氧化物歧化酶（superoxide dismutase 2，SOD2）主要用于清除線粒體的超氧化物，但其基因變異可增加抗結(jié)核藥物致肝毒性的易感性，谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione peroxidase 1，GPX1）可抑制線粒體氧應激的產(chǎn)生，同樣由于其基因多態(tài)性，抑制作用大大降低。

4. 跨膜轉(zhuǎn)運蛋白

藥物及其代謝產(chǎn)物通常不是通過被動擴散的方式穿過肝細胞膜，而是通過頂端或小管膜上的特定藥物轉(zhuǎn)運體出入肝細胞。典型的基側(cè)膜的轉(zhuǎn)運體包括有機陰離子轉(zhuǎn)運體和有機陰離子轉(zhuǎn)運多肽家族；具有代表性的流入膽汁的轉(zhuǎn)運體包括小管轉(zhuǎn)運體多耐藥相關蛋白2（MRP2）、乳腺癌抗癌蛋白和多耐藥糖蛋白1（MDR-1）和膽鹽輸出泵（BSEP）等。大多數(shù)導致膽汁淤積的藥物都有幾個屬于轉(zhuǎn)運蛋白ATP結(jié)合盒（ABC）超家族，存在于肝小管表面。環(huán)孢菌素、易福平、雌二醇直接或間接抑制BSEP蛋白、MRP2和MDR3.轉(zhuǎn)運蛋白的基因變異不僅可導致肝臟疾病，而且可誘導特異性藥物介導的轉(zhuǎn)運損傷，形成個體易感性。

線粒體損傷機制

Kaplwitz認為藥物性肝損傷發(fā)病機制的3個主要連續(xù)步驟為：①藥物及其代謝產(chǎn)物首先引起直接的細胞應激（內(nèi)源性途徑）；②觸發(fā)免疫反應（外源性途徑）；③直接損傷線粒體功能，同時可能直接導致線粒體膜通透性的改變，觸發(fā)細胞凋亡或壞死。

耐受性、適應性和易感性

在繼續(xù)應用肝損害藥物的情況下，由藥物引起的血清ALT水平升高多數(shù)仍可消退。血清ALT水平的短暫升高可反映某種藥物的確可引起肝損傷，但其后在繼續(xù)應用這種藥物的情況下，肝臟可能已產(chǎn)生“適應性”改變，而不出現(xiàn)明顯損傷。

一項研究觀察了機體對異煙肼等藥物引起的藥物性肝損傷的適應性。在某精神病醫(yī)院的一次肺結(jié)核暴發(fā)之后，201例結(jié)核菌素皮膚試驗陽性的男性患者開始預防性服用異煙肼。研究者每月收集患者及107例皮試陰性且未服用異煙肼的居住在相同條件下的患者的血清標本，連續(xù)一年。結(jié)果顯示，在治療期間有3例患者血清ALT水平升高達【15～30】×ULN，伴血清總膽紅素升高（>3 mg/dL）。盡管繼續(xù)異煙肼治療，但每例患者的血清指標異常均恢復到基線水平，提示對異煙肼產(chǎn)生適應性耐受。作者由此推論：上述現(xiàn)象提示這樣一種可能，進展為臨床藥物性肝炎的患者，其肝臟未能適應或產(chǎn)生足夠的修復機制，以應對異煙肼的刺激。潛在的適應機制包括肝酶表達和轉(zhuǎn)運蛋白的改變，以及免疫機制。

關于Hy's法則

符合Hy's法則包括以下三個方面：①藥物可導致肝細胞損傷，通常表現(xiàn)為ALT和AST升高>3ULN或更高；②在轉(zhuǎn)氨酶升高>3×ULN患者中，少數(shù)會表現(xiàn)出血清總膽紅素>2×ULN，這些患者無膽道阻塞的證據(jù)，無膽囊或膽道疾病引起的指堿性磷酸酶增高，亦無腫瘤、吉爾伯特綜合征或使用阿扎那韋等導致的糖脂化作用受損；③沒有其他可以解釋轉(zhuǎn)氨酶和膽紅素同時升高的原因，比如甲、乙、丙型病毒性肝炎，酒精或自身免疫性肝炎，或是服用另外可導致肝損傷的藥物。

在臨床試驗中若發(fā)現(xiàn)1例屬于Hy's法則的不良反應是令人擔憂的，如果出現(xiàn)2例則強烈提示該藥在擴大人群的應用中可能引起嚴重的藥物性肝損傷。

藥物性肝損傷生物學標志物

英國愛丁堡皇家醫(yī)院的研究人員對對乙酰氨基酚過量所致的藥物性肝損傷患者監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，以下生物學標志物的升高可識別對乙酰氨基酚過量的藥物性肝損傷患者以及ALT在正常范圍內(nèi)患者的急性肝損傷的后續(xù)進展：肝細胞損傷分子標志物microRNA-122，壞死性分子標志物如高遷移性組合蛋白1（HMGB1）和半胱天冬酶裂解角蛋白18（K18），以及線粒體功能障礙分子標志物谷氨酸脫氫酶（GLDH）。這些生物學標志物的臨床開發(fā)有助于提高藥物性肝損傷的臨床決策速度。

藥物性肝損傷診斷新理念

2011年，國際嚴重不良反應協(xié)會（iSAEC）組織專家工作組對藥物性肝損傷的臨床表型統(tǒng)一分類進行討論，并頒布了藥物性肝損傷標準化命名的國際共識。在藥物性肝損傷臨床生化指標的閾值上，將ALT值提高到5×ULN以上。這樣可將不重要的自限性藥物相關事件和NASH等排除，低水平閾值也易導致不必要的檢查和不恰當?shù)耐Ｋ?。iSAEC定義了符合以下任何一條，可達到藥物性肝損傷生化學診斷標準：①ALT水平≥5倍ULN；②ALP水平≥2×ULN，特別是伴有5'核苷酸酶或GGT升高，但沒有骨病者；③ALT水平≥3×ULN，同時總膽紅素≥2×ULN.

藥物性肝損傷治療藥物

N-乙酰半胱氨酸（N-acetyl cysteine，NAC）為小分子單肽，具有脂溶性特性，易進入細胞內(nèi)發(fā)揮作用（如清除自由基），其所含的巰基代謝產(chǎn)物可刺激還原型谷胱甘肽合成，提高非酶抗氧化物水平。大量的基礎研究提示，NAC作用的靶細胞主要包括肝臟的肝細胞、內(nèi)皮細胞、庫普弗細胞以及紅細胞、肺泡上皮細胞，這也可部分解釋為何其臨床上可用于呼吸系統(tǒng)疾病和相關肝病的治療。

2011年，NAC作為唯一被FDA批準用于治療對乙酰氨基酚中毒引起肝功能衰竭的藥物，在同年美國肝病研究協(xié)會（AASLD）發(fā)布的急性肝功能衰竭（ALF）診療指南中被推薦。此外，NAC可用于毒蕈所致的ALF的治療。2012年，歐洲肝病研究協(xié)會（EASL）關于酒精性肝病的臨床實踐指南提出，NAC和皮質(zhì)類固醇具有協(xié)同效應，推薦兩藥聯(lián)用可改善重度酒精性肝炎患者1個月生存率，并可能降低肝腎綜合征和感染的發(fā)生。