（一）溶劑提取法

　　1.溶劑選擇

　?。?）溶劑按極性分類：三類，即親脂性有機(jī)溶劑、親水性有機(jī)溶劑和水。常用于中藥成分提取的溶劑按極性由弱到強(qiáng)的順序如下：

　　石油醚＜四氯化碳＜苯＜二氯甲烷＜氯仿＜乙醚＜乙酸乙酯＜正丁醇＜丙酮＜甲醇（乙醇）＜水。

　?。?）溶劑選擇要點(diǎn)：中藥化學(xué)成分中，萜、甾等大環(huán)、稠環(huán)化合物極性小，易溶于氯仿、醫(yī).學(xué)教育網(wǎng)搜集整理乙醚等；糖、苷等易溶于水、乙醇等極性溶劑中；酸堿性成分因存在狀態(tài)不同溶解性不同。

　　（3）常用溶劑特點(diǎn)：

　?、偎簽閮r廉、易得、使用安全的強(qiáng)極性溶劑。適于提取無機(jī)鹽、糖、氨基酸、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸鹽、生物堿鹽、苷類等。

　　②親水性有機(jī)溶劑：以乙醇最常用。高濃度提取親脂性成分，低濃度提取親水性成分。

　?、塾H脂性有機(jī)溶劑：石油醚、苯、乙醚、氯仿、乙酸乙酯。

　　具有較強(qiáng)的選擇性，對揮發(fā)油、油脂、葉綠素、樹脂、內(nèi)酯、某些生物堿及一些苷元均可提取出來。優(yōu)缺點(diǎn)：沸點(diǎn)低，濃縮回收方便，但易燃、有毒、價貴，穿透力差。

　　2.提取方法

　　（1）煎煮法：溶劑：水，缺點(diǎn)：以水為提取溶劑，故對親脂性成分提取不完全，且含揮發(fā)性成分及加熱易破壞的成分不宜使用。多糖類成分含量較高的中藥，用水煎煮后藥液黏度較大，過濾困難。

　?。?）浸漬法：以水或稀醇反復(fù)提取，優(yōu)點(diǎn)：不用加熱，適用于遇熱易破壞或揮發(fā)性成分，含淀粉或黏液質(zhì)多的成分適用；缺點(diǎn)：提取時間長，效率不高。

　　（3）滲漉法：以稀乙醇或酸水作溶劑，先浸后滲，不需加熱，提取效率高于浸漬法。

　　（4）回流提取法：以有機(jī)溶劑為提取溶劑，在回流裝置中加熱進(jìn)行。一般多采用反復(fù)回流法。優(yōu)點(diǎn)：提取效率高，但受熱易破壞的成分不宜用。

　?。?）連續(xù)回流提取法：有機(jī)溶劑，索氏提取器或連續(xù)回流裝置，優(yōu)點(diǎn)：提取效率高、節(jié)省溶劑；缺點(diǎn)：影響因素多、工業(yè)化生產(chǎn)是需優(yōu)化。

　?。ǘ┧魵庹麴s法

　　使用范圍：適于具有揮發(fā)性，能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞的有效成分的提取。揮發(fā)油、小分子生物堿、酚類、游離醌類等。

　　二、中藥有效成分的分離

　　常用分離方法：溶劑法、沉淀法、結(jié)晶法、色譜分離法

　?。ㄒ唬┤軇┓?/p>

　　1.酸堿溶劑法：混合物中各組分的酸堿性不同進(jìn)行分離

　?。?）酸溶：有機(jī)堿性成分可與無機(jī)酸成鹽而溶于水。

　?。?）堿溶：具有羧基，用碳酸氫鈉；具有酚羥基，用氫氧化鈉；具有內(nèi)酯或內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)的成分可被皂化而溶于水。

　　使用注意：酸堿的強(qiáng)度、加熱溫度、與被分離成分接觸的時間等。

　　2.溶劑分配法

　　原理：利用混合物中各成分在互不相溶的兩相溶劑中分配系數(shù)不同而達(dá)到分離的方法。

　　成分在兩相溶劑中分配系數(shù)相差越大，則分離效率越高。一般采用少量多次分配醫(yī).學(xué)教育網(wǎng)搜集整理提高萃取效率。需要注意的是防止乳化。

　?。?）系統(tǒng)溶劑萃取法：常用于中藥化學(xué)成分的初步分離漏斗

　?。?）連續(xù)液-液萃取裝置

　　（3）液滴逆流層析法

　?。ǘ┏恋矸?/p>

　　原理：基于有些中藥化學(xué)成分能與某些試劑生成沉淀，或加入某些試劑后可降低某些成分在溶液中的溶解度而自溶液中析出的一種方法。

　　1.專屬試劑沉淀法：例如：雷氏銨鹽沉淀季銨堿、膽甾醇沉淀甾體皂苷；明膠沉淀鞣質(zhì)。

　　2.分級沉淀法：改變加入溶劑的極性或數(shù)量使沉淀逐步析出的方法。多糖、蛋白質(zhì)等。

　　3.鹽析法：在混合物水溶液中加入易溶于水的無機(jī)鹽，最常用的是氯化鈉，至一定濃度或飽和狀態(tài)，使某些中藥成分在水中溶解度降低而析出，或用有機(jī)溶劑萃取出來。

　?。ㄈ┙Y(jié)晶法

　　1.原理：利用混合物中各成分在溶劑中的溶解度不同達(dá)到分離的方法，是純化物質(zhì)最后階段常采用的方法，其目的在于進(jìn)一步分離純化目標(biāo)化合物。

　　2.溶劑選擇：被溶解成分的溶解度隨溫度不同應(yīng)有顯著差別；與被結(jié)晶的成分不應(yīng)產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)；沸點(diǎn)適中等。常用于結(jié)晶的溶劑有甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸、吡啶等。

　　3.當(dāng)用單一溶劑不能達(dá)到結(jié)晶時，可用兩種或兩種以上溶劑組成的混合溶劑進(jìn)行結(jié)晶操作。

　　（四）色譜分離法

　　1.吸附色譜

　　原理：利用吸附劑對被分離化合物分子的吸附能力的差異，而實(shí)現(xiàn)分離的一類色譜。常用的吸附劑包括硅膠、氧化鋁、活性炭、聚酰胺等。

　?。?）硅膠：吸附作用是由于顆粒表面有很多硅醇基，它可以和許多化合物形成氫鍵而具有一定的吸附作用，極性大小分離，廣泛，大多數(shù)成分的分離，微酸性、不宜分離堿性物質(zhì)。

　　（2）氧化鋁：微堿性、適宜分離堿性物質(zhì)。

　?。?）聚酰胺：適于分離黃酮、酚、醌類、有機(jī)酸及鞣質(zhì)。

　　聚酰胺中的酰胺基可與酚羥基、羧基、羰基、硝基等形成氫鍵吸附。聚酰胺的吸附容量大。被分離成分的結(jié)構(gòu)與吸附力的關(guān)系：

　?、倏尚纬蓺滏I的基團(tuán)數(shù)目越多，則吸附能力越強(qiáng)，越難被洗脫。

　?、谛纬煞肿觾?nèi)氫鍵的吸附能力會減弱。

　?、鄯肿又蟹枷慊潭仍礁?，吸附能力越強(qiáng)。

　?、軐埘０分南疵撃芰?，與溶劑的種類有關(guān)：甲酰胺，丙酮，甲、乙醇，水依次減弱。

　　2.凝膠過濾色譜（排阻色譜、分子篩色譜）

　　原理：主要是分子篩作用，根據(jù)凝膠的孔徑和被分離化合物分子的大小而達(dá)到分離目的。

　　當(dāng)混合物溶液通過凝膠柱時，比凝膠孔隙小的分子可以自由進(jìn)入凝膠內(nèi)部，而比凝膠孔隙不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部，只能通過凝膠顆粒間隙，首先被洗出。

　　常用的是葡聚糖凝膠（sephadexG）和羥丙基葡聚糖凝膠（sephadexLH-20）。

　　3.離子交換色譜

　　原理：基于各成分解離度的不同而分離。

　?、匐x子交換劑的種類：離子交換樹脂、離子交換纖維素、離子交換凝膠。

　?、趹?yīng)用：主要用于生物堿、有機(jī)酸及氨基酸、蛋白質(zhì)、多糖等水溶性成分的分離純化

　　4.大孔樹脂色譜

　　原理：大孔樹脂是一類沒有可解離基團(tuán)，具有多孔結(jié)構(gòu)，不溶于水的固體高分子物質(zhì)。它可以通過物理吸附有選擇地吸附有機(jī)物質(zhì)而達(dá)到分離的目的。

　　①色譜行為：反相的性質(zhì)，一般被分離物質(zhì)極性越大，越先被洗脫下來，極性越小，越后洗脫下來。對洗脫劑而言，極性大的溶劑洗脫能力弱，而極性小的溶劑則洗脫能力強(qiáng)，故大孔樹脂在水中的吸附性強(qiáng)。

　　②大孔吸附樹脂色譜被引進(jìn)應(yīng)用于中藥有效部位或有效成分的分離富集。它具有選擇性好、機(jī)械強(qiáng)度高、再生處理方便、吸附速度快等特點(diǎn)。

　?、鄯诸悾焊鶕?jù)骨架材料是否帶功能基團(tuán)，大孔吸附樹脂可分為非極性、中等極性與極性三類。

　　5.分配色譜

　?。?）基本原理

　　利用物質(zhì)在固定相和流動相之間分配系數(shù)不同而達(dá)到分離。

　?。?）分類

　　正相色譜：固定相極性>流動相極性，用于分離極性和中等極性的成分。常用固定相：氰基或氨基鍵合相；常用流動相為有機(jī)溶劑。

　　反相色譜：固定相極性<流動相極性，用于離非極性和中等極性的成分，常用C18或C8鍵合相。常用流動相為甲醇-水或乙腈-水。