醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)臨床醫(yī)學(xué)檢驗主管技師：《答疑周刊》2015年07期

2015-01-09 13:49 來源：

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醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)臨床醫(yī)學(xué)檢驗主管技師：《答疑周刊》2015年07期

【問題】化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型及原理？

化學(xué)發(fā)光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA)，是將具有高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)與高特異性的免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術(shù)。是繼放免分析、酶免分析、熒光免疫分析和時間分辨熒光免疫分析之后發(fā)展起來的一項最新免疫測定技術(shù)。

1化學(xué)發(fā)光免疫分析原理

化學(xué)發(fā)光免疫分析包含兩個部分,即免疫反應(yīng)系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)?；瘜W(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)是利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)經(jīng)催化劑的催化和氧化劑的氧化,形成一個激發(fā)態(tài)的中間體,當(dāng)這種激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時,同時發(fā)射出光子(hM),利用發(fā)光信號測量儀器測量光量子產(chǎn)額。免疫反應(yīng)系統(tǒng)是將發(fā)光物質(zhì)(在反應(yīng)劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體)直接標(biāo)記在抗原(化學(xué)發(fā)光免疫分析)或抗體(免疫化學(xué)發(fā)光分析)上,或酶作用于發(fā)光底物。

2化學(xué)發(fā)光免疫分析的類型

化學(xué)發(fā)光免疫分析法以標(biāo)記方法的不同而分為兩種:

(1)化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析法。

(2)酶標(biāo)記、以化學(xué)發(fā)光底物作信號試劑的化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法。

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【問題】Coombs試驗的配血原理是什么？

凡Coombs試驗即抗人球蛋白試驗，是檢測血液中溫反應(yīng)性抗體的一種方法，也是診斷自身免疫性溶血性貧血的重要指標(biāo)。溫抗體中50%以上由IgG介導(dǎo)，其次為IgM，IgA和C3d等，因此本試驗應(yīng)分選各種單克隆抗體同時測定。Coombs試驗分為直接試驗（直接反應(yīng)）和間接試驗（間接反應(yīng)）：直接試驗的目的是檢查紅細胞表面的不完全抗體；間接試驗的目的是檢查血清中存在游離的不完全抗體。

（1）直接coombs試驗用于檢測已粘附在紅細胞表面的不完全抗體。即將受檢紅細胞充分洗滌后，將抗球蛋白試劑加入已結(jié)合有抗體的受檢紅細胞懸液中，即可見細胞凝集?？捎貌Ｆㄗ龆ㄐ栽囼灒部捎迷嚬芊ɑ蛭⒘糠ㄗ霭攵繙y定。用于檢測新生兒溶血癥、自身免疫性貧血和醫(yī)源性溶血性疾病等。

（2）間接coombs試驗用于檢測游離在血清中的不完全抗體。即將待測血清標(biāo)本加入具有特異抗原的紅細胞懸液中，如果抗原抗體相應(yīng)則發(fā)生結(jié)合，再加入抗球蛋白抗體，則出現(xiàn)紅細胞凝集。本法多用于檢測母體Rh（D）抗體以及因紅細胞不相容的輸血而產(chǎn)生的血型抗體。此外也可用專一特異性的抗球蛋白血清，如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗補體血清等，分析與紅細胞表面結(jié)合的不完全抗體的Ig亞類。

【問題】肝細胞性黃疸,血中為什么兩種膽紅素都升高，尿膽原正?；蛏?？

要搞清楚這個問題，必須先弄清人體的膽紅素代謝過程：

在膽紅素(膽汁成分)的代謝過程中，肝細胞承擔(dān)著重要任務(wù)。首先是衰老紅細胞分解形成的間接膽紅素隨血液循環(huán)運到肝細胞表面時，肝細胞膜微絨毛將其攝取，進入肝細胞內(nèi)，與Y、Z蛋白固定結(jié)合后送至光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中，靠其中葡萄醛酸基移換酶的催化作用，使間接膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合成直接膽紅素(色素I、II混合物)；在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基氏體、溶酶體等參與下直接膽紅素排泄到毛細膽管中去。可見肝細胞具有攝取、結(jié)合、排泄膽紅素的功能。

當(dāng)患肝炎時，肝細胞成為各種病毒侵襲的靶子和復(fù)制繁殖的基地，在機體免疫的參與下，肝臟大量細胞功能減退，受損壞死，致部分直接、間接膽紅素返流入血。血液中增高的膽紅素(34.2umol/L)把眼鞏膜和全身皮膚染黃，形成黃疸。

需要知道的是，各種肝炎患者的肝細胞并不是全部被破壞，健康的肝細胞會代償性地“努力工作”，而被破壞的肝細胞基本上喪失了各種功能，并且還可以將大量的非結(jié)合膽紅素、結(jié)合膽紅素直接釋放入血，造成血液里的總膽紅素、非結(jié)合膽紅素、結(jié)合膽紅素濃度都有升高。

在腸道中生成的尿膽原會有一部分被吸收入血，經(jīng)門脈入肝。正常情況下這部分尿膽原大多被肝細胞重新轉(zhuǎn)變?yōu)榻Y(jié)合膽紅素，極少量沒被肝細胞吸收的才會經(jīng)腎排出，這就是尿中的尿膽原。但肝細胞受損了，就不能轉(zhuǎn)化尿膽原了，所以從腸道吸收入血的尿膽原幾乎全部要經(jīng)腎排出。這就是為什么腸道產(chǎn)尿膽原少了，尿中尿膽原反而多了。

因此肝細胞性黃疸：處理障礙。血中兩種膽紅素都升高，尿膽原正?；蛏撸蚰懠t素陽性。

【臨床血液學(xué)檢驗】

紅細胞數(shù)降低的程度比血紅蛋白更顯著，最可能的診斷是

A.失血

B.再生障礙性貧血

C.巨幼紅細胞性貧血

D.溶血

E.缺鐵性貧血

【正確答案】C

學(xué)員提問：失血，再生障礙性貧血，缺鐵貧，是怎樣的一個情況，它的紅細胞和血紅蛋白會有怎樣的一個變化?

解析：再生障礙性貧血呈全血細胞減少，貧血屬正常細胞型，亦可呈輕度大紅細胞。紅細胞輕度大小不一，但無明顯畸形及多染現(xiàn)象，一般無幼紅細胞出現(xiàn)。網(wǎng)織紅細胞顯著減少。

缺鐵性貧血早期或輕度缺鐵可以沒有貧血或僅極輕度貧血。晚期或嚴(yán)重缺鐵有典型的小細胞低色素型貧血。紅細胞壓積和血紅蛋白濃度降低的程度通過紅細胞計數(shù)減少的程度。還可見很少的靶形、橢圓形或其他不規(guī)則形態(tài)的紅細胞。網(wǎng)織紅細胞計數(shù)大多正常，白細胞計數(shù)正常或輕度減低。血小板計數(shù)高低不一。

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【臨床血液學(xué)】

紅細胞G-6-PD酶缺乏時，下列哪項試驗呈陽性反應(yīng)

A．抗人球蛋白試驗

B．熱溶血試驗

C．高鐵血紅蛋白還原試驗

D．酸溶血試驗

E．血紅蛋白電泳出現(xiàn)異常區(qū)帶

【正確答案】C

學(xué)員提問：為什么

解答：紅細胞G6PD缺陷癥：本病分5型：蠶豆病、藥物致溶貧、感染誘發(fā)溶血、新生兒高膽紅素血癥和遺傳性非球形紅細胞溶貧。①篩檢試驗：高鐵血紅蛋白還原試驗：G6PD活性雜合子中等缺乏者74%～31%，臍血77%～41%；純合子或半合子G6PD嚴(yán)重缺乏者大于30%，臍血小于40%。G6PD熒光斑點法：G6PD活性中等缺乏者10～30min出現(xiàn)熒光；嚴(yán)重缺乏者30min不出現(xiàn)熒光。②確診試驗：G6PD活性減少。

酸溶血試驗是診斷陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥的主要確診試驗。

酸溶血試驗，又稱Ham試驗。指病人紅細胞與酸化后的血清一起置37℃環(huán)境中作用，紅細胞發(fā)生破壞，即為陽性。

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【臨床化學(xué)檢驗】

關(guān)于細胞酶的釋放，錯誤的是

A．酶蛋白分子量的大小：試驗證明酶釋放的速度和分子量成正比

B．胞質(zhì)中游離的酶如ALT、LD最容易釋放入血

C．非血漿特異的酶在細胞內(nèi)、外濃度可差千倍以上，只要有少量細胞受損傷，酶從細胞中釋出，就可使血液中酶明顯升高

D．血管內(nèi)皮細胞和血細胞的酶直接進入血液

E．酶大部分進入組織間隙后再入血

【正確答案】C