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布氏桿菌微生物學(xué)檢驗

一、生物學(xué)性狀

本菌屬初次分離培養(yǎng)時多呈小球桿狀,毒力菌株有菲薄的微莢膜,經(jīng)傳代培養(yǎng)漸呈桿狀,革蘭氏染色陰性。

本菌為嚴格需氧菌。牛布氏桿菌在初次分離時,需在5~10%CO2環(huán)境中才能生長,最適溫度37℃,最適的pH6.6~7.1,營養(yǎng)要求高,生長時需硫胺素,煙草酸和生物素,泛酸鈣等,實驗室常用肝浸液培養(yǎng)基或改良厚氏培養(yǎng)基。此菌生緩慢,培養(yǎng)48小時后才出現(xiàn)透明的小菌落,雞胚培養(yǎng)也能生長。

在自然界中抵抗力較強,在病畜的臟器和分泌物中,一般能存活4個月左右,在食品中約能生存2個月。對低溫的抵抗力也強,對熱和消毒劑抵抗力弱。對鏈霉素、氯霉素和四環(huán)素等均敏感。

布氏桿菌具有二種抗原成份:A(牛布氏桿菌主要抗原成份)和M(羊布氏桿菌主要抗原成份)。二種抗原在各種菌中含量不同,牛布氏桿菌(Am)含a 抗原多,含M抗原少。羊布氏桿菌(aM)含M抗原多,而含A抗原少。可利用凝集吸收試驗制備出單因子血清~~單價A或M血清,供菌種鑒定之用。

二、致病性和免疫性

本菌侵入人體后,被吞噬細胞吞噬,由于本菌具有莢膜,能抵抗吞噬細胞的吞噬消毀,并能在該細胞內(nèi)增殖。經(jīng)淋巴管至局部淋巴結(jié),待繁殖到一定數(shù)量后,突破淋巴結(jié)屏障而進入血流,反復(fù)出現(xiàn)菌血癥。由于內(nèi)毒素的作用,病人出現(xiàn)發(fā)熱、無力等中毒癥狀,以后本菌隨血液侵入脾、肝、骨髓等細胞內(nèi)寄生,血流中細菌逐步消失,體溫也逐漸消退。細菌在細胞內(nèi)繁殖至一定程度時,再次進入血流又出現(xiàn)菌血癥,體溫再次上升,反復(fù)呈波浪熱型。本菌多為細胞內(nèi)寄生,治療難于徹底,易轉(zhuǎn)為慢性及反復(fù)發(fā)作,在全身各處引起遷徒性病變。

病后可生產(chǎn)免疫力,在不同菌種和生物型之間有交叉免疫。布氏桿菌多為細胞內(nèi)寄生,抗體不易直接發(fā)揮作用,故一般診斷細胞免疫較重要。

三、微生物學(xué)檢驗

本菌傳染性大,要注意防止實驗室污染。

(一)分離培養(yǎng)

急性期采集血液,慢性期采取骨髓,接種于雙相肝浸液培養(yǎng)基(一半斜面,一半液體)置37℃10%CO2環(huán)境中培養(yǎng),每隔2天檢查一次,如無細菌生長則搖蕩培養(yǎng)基,使液體浸過斜面上,有細菌生長,可依鑒定項目確定是否為布氏桿菌。經(jīng)一月培養(yǎng)無細菌生長,可報告陰性。

(二)血清學(xué)檢查

通常作凝集試驗,判定凝集效價1:50可疑,1:100以上為陽性。效價增高4倍以上時,更有診斷價值。

四、特異性防治

預(yù)防本病的根本措施在于控制和消滅畜間布氏桿菌病的流行。對經(jīng)常接觸牲畜或有關(guān)人群用凍干減毒活苗作皮上劃痕接種。急性病人治療以抗生素為主,一般認為四環(huán)素與鏈霉素或磺胺聯(lián)合治療效果較好,需徹底治療,防止轉(zhuǎn)為慢性。

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